病理科组织脱水、包埋程序及质量控制

组织固定、脱水、透明、浸蜡直至包埋，是制作优质切片的关键过程。该过程也称为组织处理。一旦组织处理有欠缺，往往导致无法挽回的后果。

固定后的组织不能直接用蜡渗透，首先要脱去组织中的水分。通常经过一系列的梯度乙醇脱水，如80%→95%→100%。第一步也可使用乙醇和福尔马林混合液。也可以用其它脱水剂。丙酮脱水非常快，但容易燃烧，为了安全，只有在手工处理组织时可少量使用。大多数脱水剂不能与石蜡直接相溶，所以脱水后必须再经过透明剂作用，才能对组织进行浸蜡。最后用石蜡包埋组织块。

透明剂即可以与脱水剂相溶又能和石蜡相溶。透明剂是脱水和浸蜡的媒介剂，在组织处理中起着桥梁作用，当组织被透明剂浸透后，组织呈透明状态。透明剂作用于组织的过程，称为组织透明。最常用的透明剂是二甲苯。甲苯的作用非常好，组织中剩余少量水分也能使组织透明，但价格比二甲苯贵的多。使用氯仿透明对人的健康有危害。水杨酸甲脂也可以用于组织透明，但很少使用，主要是价格太贵。

组织经过二甲苯透明后，浸泡在熔化的石蜡中，组织浸蜡一般要通过2～3个蜡缸（蜡1、蜡2、蜡3），最终以石蜡替换出组织中的透明剂。石蜡的熔点一般为56～58℃，浸蜡的温度通常比蜡的熔点高2℃左右。

上述组织处理过程一般由脱水机自动处理（也可手工操作）。组织在脱水机中从一个缸内移到另一个缸内，从一种试剂移到另一种试剂中，完全按照预先设置的时间和温度程序自动完成。高档的脱水机是由电脑控制，对试剂的密闭效果好，具有真空和加热功能，使组织的处理更加完善。

组织处理的质量控制：

1.组织的处理时间，视组织的性质和组织块的大小而有所不同。致密的组织、富含脂肪或纤维组织，处理所需的时间要比结构细腻、细胞成分多的组织长。最好能根据组织的性质和大小分类，分批进行处理，以便于掌握时间，保证质量。

2.较细小的组织，例如内窥镜钳取标本，穿刺标本，应与较大的组织块分别进行处理。小组织滤纸包裹或者装入专用的网状脱水盒内，以免遗失。

3.组织处理所用的各种试剂，可根据工作量的大小，试剂消耗情况定时更换新液。一般情况下一月更换一次。

使用脱水机的参考程序：

程序一：下午下班前运行脱水机。第二天上午8时开始包埋。

时间 试剂

17:00 运行

1 17:45 出 10％中性福尔马林溶液

2 18:30 出 10％中性福尔马林溶液

3 20:00 出 80%乙醇

4 21:00 出 90%乙醇

5 23:00 出 95%乙醇

6 24:00 出 95%乙醇

7 1:30 出 100%乙醇

8 3:00 出 100%乙醇

9 3:30 出 二甲苯

10 4:00 出 二甲苯

11 5:30 出 石蜡（54℃）

12 8:00 出 石蜡（58℃）（蜡缸温度62℃）

程序二：

时间 试剂

16：00运行

1 16:45 出 10％中性福尔马林溶液

2 17:30 出 10％中性福尔马林溶液

3 18:00 出 80%乙醇

4 19:30 出 90%乙醇

5 22:00 出 95%乙醇

6 22:30 出 95%乙醇

7 0:30 出 无水乙醇

8 2:30 出 无水乙醇

9 3:00 出 二甲苯

10 3:30 出 二甲苯

11 4:30 出 石蜡 (58℃)

12 5:30 出 石蜡(58℃)

13 7:30 出 石蜡 (58℃)

上述脱水、浸蜡及时间控制程序是经过长期的实际工作总结，并适合免疫组化的质量要求，一年四季的温度、湿度变化等编制而成的。其中考虑到每种化学试剂的具体作用，特性和取材类型，在实际的工作应用中其效果，原则上满意，可以保证常规切片的质量。如今后有工作人员需要对上述脱水、浸蜡时间程序改动，除了要考虑到上述因素之外，先提交申请，申明改动的理由及改进原理，经科主任批准后，可以开始批量试验。在新程序不成熟以前，不准日常工作应用！待批量结果实验以后，经全科工作人员对此进行评估，决定应用与否。如违背此规定，擅自改动者，为第一责任人，出现差错者应受相应的处分。

工作中自动脱水机使用时的注意事项：

1.按脱水、透明、浸蜡顺序设置试剂缸，缸的位置要准确，使标本挂篮升降转换时准确落入下一级缸内。

2.保持各试剂缸内的试剂液面有足够的高度，以使组织全部侵入液体内。

3.按设计好的组织处理时间表，调定时间控制装置。

4.调定浸蜡缸温度，一般要高出所用石蜡熔点温度2℃左右。

5.将盛有组织块的挂篮挂于升降架的挂钩上，使之落入第一个脱水缸内，启动机器后开始计时运转。

6.当完成最后一道程序后，应及时取出标本进行包埋（必要时随手关机）。