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石蜡切片质量控制
时间:2023-09-11 11:47
点击数:125
(1)切片前首先装好切片刀,把刀牢牢固定,否则,切片中就会发生许多人为现象。(最常见的人为现象是波纹,厚薄不均等)。
(2)蜡块装到切片机的蜡块夹上,夹持要平稳牢固。调整好蜡块的方位,不能偏斜,刀刃与蜡块的上、下缘平行。切片刀与蜡块的平面之间应保持一定的角度(清除角),一般为3~8度,以免刀刃面将组织刮坏。
(3)修蜡块时要循序渐进,力争修出最大面,又要防止小组织被修坏、修光。
(4)切片时连续转动手轮,用力要平稳、均匀。常规切片厚3~5μm。
(5)切下的蜡片相连成带状。待蜡带切至一定长度时,右手用镊子夹住蜡片末端,左手持毛笔轻轻将蜡带的另一端与切片刀拨离。
(6)将蜡片较光滑的一面朝下置于温水中(通常捞片水温在42℃左右),并用镊子帮助展开,去除皱纹后,选择完整、无划痕、厚薄均匀的蜡片,附贴到载玻片上。
(7)附贴时,务使蜡片与玻片之间无气泡。玻片一端应留有1/3的位置贴号码标签用。将蜡片附贴在另外2/3的中心位置。
(8)切片放入62℃烤箱中约30~60分钟烤片,以免发生脱片。为了防止脱片可以选用涂甘油蛋清片和挂胶片。比较常用的挂胶片有明胶片,APES胶片和多聚赖氨酸胶片等,免疫组化染色尤需要使用胶片。
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